鸭病毒性肝炎(DVH)主要是3~20日龄的鸭发病,临床症状发病急,死亡快,死前呈角弓反张姿势和病鸭肝肿胀,表面有出血斑点为病变特征的病毒性传染病。我县年出栏肉鸭2000多万只,鸭群DVH发病率高,死亡多,经济损失大。笔者试用鸡作为免疫蛋源,制备DVH卵黄抗体,临床试用效果良好,兹介绍于下。
1试验材料与方法
1.1高产蛋鸡的选择
选择健康高产母鸡30只,隔离饲养,加强饲料营养和预防细菌感染,观察1周,正常时接种疫苗。
1.2DVH弱毒疫苗
由江苏农科院近期生产,-15℃冷冻保存。
3.DVH肝组织上清液油剂灭活苗制备1.3.1制水相:采用无菌手法,取新鲜且有DVH典型病灶的肝,除去胆囊、称重、切开后,1∶3的比例,用生理盐水稀释捣碎,置于瓶中,加双抗,置冰箱反复冻融3次,离心,取上清,再加入肝组织,按上述方法处理,取其上清液(保留200ml冻存备用),加0.5%福尔马林(分析纯)混合,在37℃下灭活24h,即可达到灭活目的,再加4%吐温80ml高速搅拌5min,装瓶,即为水相。
1.3.2制油相:取10号白油和司本DA96∶4混合加入2%硬脂酸铝,高压灭菌后即为油相。
1.3.3制油苗:以油相与水相3∶1的比例,先高速搅拌油相3min,然后逐渐加入水相,边搅拌边搅拌,直至加入水相后再高速搅拌3min(10000转/min),检查:静置72h或3000转/min离心不分层,判定合格。
1.4卵黄抗体的制备
1.4.1准备高免蛋:将DVH弱毒苗,用生理盐水稀释,每只以2倍量饮水接种疫苗,之后,于第10d和20d分别接种上述DVH油剂灭活苗2ml和4ml,注射后25d开始留蛋,留取20d的高免蛋,消毒备用。
1.4.2制备孵黄抗体:将消毒的高无菌蛋分离出卵黄,以1:3的比例用生理盐水稀释,过滤均匀浆,加入双抗冻保存。
2安全试验和保护试验
2.1安全试验
5日龄小鸭颈背皮下注射卵黄抗体1~2ml,隔离饲养观察10d,其精神、食欲、粪便无明显异常。
2.2保护试验
随机抽出5日龄雏鸭20只,其中10只为试验组,另10只为对照组。2组均皮下注射上述肝组织上清液0.5ml,分别隔离,同条件下饲养。24h后对试验组,皮下注射卵黄抗体1ml,饲养观察14d。
2.3结果
试验组的雏鸭均健活。对照组雏鸭接种肝毒液后,第4、5d分别死亡4只和5只,其馀1只,精神不振,食欲减退,只能喝少量水,第9d衰弱死亡,死亡率为100%。实验组因注射卵黄抗体而受到保护,相对于对照组,保护率为100%。
3防治效果
3.1预防
我县安国镇张某,养肉鸭每批2000只,每批发生DVH,死亡10%以上,用其他药物预防,效果不理想,使用我们提供的卵黄抗体预防,3~5天龄的鸭皮下注射卵黄抗体1ml/只,10d后注射1次
3.2治疗
2003年4月13日上午,朱寨镇孙某饲养的1500只13日龄肉鸭在死前出现背部症状,剖检肝有明显出血斑点,胆囊肿大,肾充血,呈斑驳状,胰腺肿大,临床诊断DVH病,已死亡12只,即卵黄抗体皮下注射2ml,当天死亡21只,第二天早上停止死亡。之后对王店村刘某等4户所养的6400多只雏肉鸭DVH病进行了治疗,也获得较满意的效果。
4讨论
4.1给鸡接种鸭DVH肝毒油剂灭活苗,加强免疫,可获得相应的特异性卵黄抗体,防治鸭DVH疾病,有良好的效果,也可避免同源蛋黄液可能带来的疫情传播。
4.2卵黄抗体和肝组织上清液的效价,可采用中和试验等方法检测,但因条件限制无法检测,有待进一步检测。